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浅谈病毒核酸提取

发布时间:2018-3-29 来源:检验科 作者:贺习波    自动滚屏(右键暂停)

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    本实验室病毒核酸提取常用的有两种方法。一种是手工法;另一种是全自动提取仪法。手工法操作繁锁。实际工作中应用不多。下面主要谈谈全自动提取法。
    检测原理:核酸提取过程中,利用磁珠吸附原理,通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,实现磁珠/核酸的转移,自动完成核酸的提取。
    适用标本类型:血清、尿液、拭子洗液等。本实验室检测的标本为拭子标本。
    标本处理:拭子充分震荡后备用。
    核酸提取:

    1、试剂配制:蛋白酶K,每支蛋白酶K干粉中加入适量蛋白酶K稀释液,颠倒混匀10次,使其完全溶解,即可使用。溶解后置于-20℃保存,反复冻融不得超过5次,且室温放置不超过6小时。
    2、预封装深孔板准备:从试剂盒中取出真空包装的预装深孔板,颠倒混匀数次使磁珠重悬,去掉真空包装,轻甩孔板,使试剂及磁珠均集中到孔板底部,使用前小心撕云铝箔封口膜,避免孔板振动,防止液体溅出。
    3、加样:在孔板的第1列分别加入20ul蛋白酶K、200ul样本。
    4、提取:设定提取程序,将深孔板放入全自动提取仪。启动提取程序。
    5、自动化程序结束后,将第6列的洗脱液转移至干净的无核酸酶离心管中。备用。
    方法性能:

    1、快速高效。
    2、一次可同时操作1-10个标本。
    3、结果稳定及重复性好。

 


 
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